Parte 1 146 Biologia applicata, Biotecnologie, Agroambiente Le ES cells modificate vengono poi reinserite in una blastocisti ospite tramite microiniezione [ 45 ]. C è una differenza fondamentale fra le due tecniche che fanno uso di una cellula germinale o delle cellule ES. In quest ultimo caso l animale possiede il transgene solo in alcuni tessuti e viene detto chimera. Madri donatrici di cellule embrionali Per poter trasmettere il gene alle generazioni future è necessario che le chimere lo abbiano incorporato nella linea germinale [ 46 ]. Queste tecniche possono essere utilizzate per produrre animali d allevamento mutati geneticamente e a loro volta utilizzati per gli scopi più diversi. a Cellule staminali embrionali b Vettore con gene clonato Trofoblasto Colture di cellule embrionali staminali (ES) Miscela delle cellule embrionali staminali con il gene clonato Selezione delle cellule staminali embrionali che hanno incorporato il gene modificato Microiniezione delle cellule transgeniche ES nell embrione ospite Cellule transgeniche ES integrate nell embrione Inserimento degli embrioni nell utero Progenie chimera Incrocio di un topo chimera con un topo normale d Normale Chimera c Eterozigote transgenico Incrocio degli eterozigoti e Eterozigote transgenico Omozigote normale Omozigote transgenico 46 Tecniche per la produzione di animali transgenici (a) e chimerici (b). 45 Schematizzazione del percorso completo per l ottenimento di organismi transgenici e chimere: (a) procedura per l ottenimento delle ES portatrici del gene modificato; (b) le cellule transgeniche vengono integrate nell embrione; (c) gli embrioni vengono collocati nell utero per generare la progenie chimera; (d) l individuo chimera viene incrociato con un individuo normale per ottenere un eterozigote transgenico; (e) nella progenie derivata dall incrocio di due eterozigoti il gene modificato è geneticamente fissato nell individuo omozigote. a Iniezione nell uovo fecondato Transgene Uovo b Terapia germinale GLOSSARY Organismi transgenici Transgenic organisms Chimera Chimaera Patologie umane Human diseases 0110.Parte1_Cap_04.indd 146 Cellula transgenica Animale transgenico Chimera somatica Stadio di blastocisti Chimera delle gonadi 26/02/21 17:02